问：
核酸内切酶与外切酶有何不同？
答：
核酸内切酶与外切酶是两种不同的酶,它们对DNA有不同的作用:
内切酶:
1. 内切酶是一类酶,能特异性地识别DNA内部的特定序列,并在该处切割DNA分子。这种切割发生在DNA双螺旋内,因此称为内切。
2. 内切酶的识别序列通常为回文序列,即从5'端读取与从3'端读取的碱基序列是相同的。这使得内切酶只在DNA的两条链上产生同样的切割。
3. 内切酶切割DNA后,可以产生平滑的或具有单链突出端的DNA片段。平滑末端更容易重新连接。
4. 常见的内切酶有EcoRI, HindIII等,它们的识别序列包含4-8个碱基对。
外切酶:
1. 外切酶是一类能识别DNA分子末端序列并在末端切割的酶。它们的切割位点在DNA双螺旋外,所以称为外切。
2. 外切酶只能识别DNA的末端碱基,而不是内部序列。它产生的DNA片段具有不同长度的单链突出端,更难重新连接。
3. 常见的外切酶有S1 nuclease, BAL31等。
4. 外切酶的作用往往需要与内切酶结合使用,先用内切酶切割得到DNA片段,然后用外切酶进一步切短这些片段,获得不同长度的DNA片段用于诸如DNA重组等实验。
所以,内切酶和外切酶对DNA的切割位置和方式不同,用于不同的实验目的,但两者都是重要的遗传工程工具酶。