核酸内切酶与外切酶有什么不同？

核酸内切酶与外切酶的主要区别如下:

1. 作用位置不同。内切酶作用于DNA或RNA分子内部,能在双链核酸分子内产生切口;外切酶只作用于核酸分子的末端,不能在双链区域内切割。

2. 产生的切口不同。内切酶产生带有单链过hang端的切口,外切酶产生平端或带有5'或3'突出端的切口。

3. 识别序列不同。内切酶通常识别并切割较长的核酸序列(4-8个碱基),而外切酶通常只识别2-4个碱基的序列。

4. 切割机制不同。内切酶首先与目标序列结合,然后水解核酸主链产生切口;外切酶通过催化核酸末端的水解反应来切割核酸。

5. 作用效果不同。内切酶切割后可以产生较长的单链过hang端,这有利于进一步的修饰和连接;外切酶切割产生的末端较难进行进一步的修饰和连接。

6. 热稳定性不同。内切酶通常较外切酶热稳定,可在更高温度下工作。

7. 酶的类型不同。内切酶主要是酸性内切酶,碱性内切酶和型I内切酶;外切酶主要是限制性内切酶。

所以,总体来说,内切酶和外切酶在作用机制、切割产物、物理化学性质以及酶的分类等方面有一定的差异。但两者都是重要的分子生物学工具酶,在分子克隆和基因组修饰等领域有着广泛的应用。